As penicilinas amidases são utilizadas durante a produção de penicilinas semissintéticas, dado que permite gerar o núcleo das penicilinas através da eliminação da cadeia lateral da penicilina G produzida em cultivos de cepas do fungo Penicillium. Esta reação origina a formação do ácido 6-aminopenicilánico, componente que, a partir de posteriores modificações catalisadas por outras enzimas, poder-se-á obter numerosos antibióticos.

Em enzimologia, uma penicilina amidase (EC 3.5.1.11) é uma enzima que catalisa a reação química:

penicilina + H₂O ${\displaystyle \rightleftharpoons }$ carboxilato + 6-aminopenicilanato

Assim, os dois substratos desta enzima são a penicilina e a H₂O, enquanto que os seus dois produtos são um carboxilato e 6-aminopenicilanato.

Esta enzima pertence à família das hidrolases que actuam sobre ligações de carbono-nitrogénio que não sejam ligações peptídicas, especificamente em lineares amidas. A designação sistemática desta classe de enzimas é penicilina amido-hidrolase. Outros nomes que também são utilizados são penicilina acilase, bencilpenicilina acilase, novozym 217, semacilase, alfa-acilamino-beta-lactam acil-hidrolase, e ampicilina acilase. Esta enzima participa na biossíntese de penicilina e cefalosporina.